Tipo de documento:	Relatório de Pesquisa
Título:	Transformação genética para a integração de dois cassetes de expressão no genoma da levedura Pichia pastoris.
Autor(a):	João Victor de Melo Verçosa
Orientador(a):	Spartaco Astolfi Filho
Resumo:	A Pichia pastoris foi considerada uma das melhores leveduras para expressão devido a sua característica metilotrófica, pois permitem rígido controle da expressão pela simples manipulação do meio de cultura e indução por metanol. As proteínas a serem expressas serão a glicoamilase e alfa-amilase, simultaneamente, em cassetes de expressão integrados na P. pastoris. Essas enzimas estão no grupo das amilases, que compõem cerca de 30% das enzimas de uso industrial no mundo, sendo amplamente utilizadas para fermentação alcoólica de etanol. Três estratégias de transformação serão testadas, nos quais, primeiramente será integrado o gene da glicoamilase no locus aox1 e a alfa-amilase no locus his4, e o inverso, além da transformação da levedura hospedeira simultaneamente com os cassetes de expressão das duas proteínas direcionando para a integração em loci diferentes. Os clones recombinantes a serem expressos em meio líquido serão selecionados meio sólido. Após a indução, os extratos serão avaliados por meio de gel SDS-PAGE e em ensaios bioquímicos para características sacarificante e dextrinizante.
Palavras-chave:	Transformação Integração Amilases
Área de conhecimento - CNPQ:	CIÊNCIAS BIOLÓGICAS: BIOQUÍMICA
Idioma:	pt_BR
País de publicação:	Brasil
Editor:	Universidade Federal do Amazonas
Sigla da Instituição:	UFAM
Faculdade, Instituto ou Departamento:	Biologia Instituto de Ciências Biológicas
Nome do programa:	PROGRAMA PIBIC 2013
Tipo de acesso:	Acesso Restrito
URI:	http://riu.ufam.edu.br/handle/prefix/3727
Data do documento:	31-jul-2014
Aparece nas coleções:	Relatórios finais de Iniciação Científica - Ciências Biológicas

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