Use este identificador para citar ou linkar para este item:
http://riu.ufam.edu.br/handle/prefix/3728| Tipo de documento: | Relatório de Pesquisa |
| Título: | Expressão do gene da lipase de Ralstonia eutropha em Pichia pastoris |
| Autor(a): | Isabela Cavalcante Rodrigues |
| Orientador(a): | Spartaco Astolfi Filho |
| Resumo: | As lipases são enzimas pertencentes à classe das hidrolases, atuando na interface orgânica-aquosa demonstrando níveis consideráveis de atividade e estabilidade em ambientes aquosos e não-aquosos. Sua função biológica é catalisar a hidrólise de longas cadeias de triacilglicerídeos, formando ácidos graxos e glicerol, além de realizarem esterificação. Possuem vasta aplicabilidade industrial, podendo ser utilizadas na composição de detergentes, na indústria alimentícia, no tratamento de efluentes e em química fina. O objetivo do projeto é clonar e expressar o gene de uma lipase bacteriana na levedura Pichia pastoris. O gene da lipase será isolado por reação em cadeia da polimerase. Os amplicons serão inseridos no vetor de clonagem pCR4 TOPO, multiplicados em Escheria coli, liberados do vetor de clonagem por clivagem com endonucleases de restrição e subclonado no vetor de expressão pPIC9. A levedura será transformada com o vetor recombinante e a expressão da proteína será visualizada em meio sólido contendo o subtrato da lipase. Os clones recombinantes serão inoculados em meio líquido com adição de metanol 0,5% a cada 24h para indução da expressão. A proteína expressa será analisada em gel desnaturante de poliacrilamida e a atividade enzimática será determinada a partir de métodos titulométricos. |
| Palavras-chave: | Enzimas, indução da expressão, clonagem |
| Área de conhecimento - CNPQ: | CIÊNCIAS BIOLÓGICAS: BIOQUÍMICA |
| Idioma: | pt_BR |
| País de publicação: | Brasil |
| Editor: | Universidade Federal do Amazonas |
| Sigla da Instituição: | UFAM |
| Faculdade, Instituto ou Departamento: | Biologia Instituto de Ciências Biológicas |
| Nome do programa: | PROGRAMA PIBIC 2013 |
| Tipo de acesso: | Acesso Restrito |
| URI: | http://riu.ufam.edu.br/handle/prefix/3728 |
| Data do documento: | 31-jul-2014 |
| Aparece nas coleções: | Relatórios finais de Iniciação Científica - Ciências Biológicas |
Arquivos associados a este item:
Não existem arquivos associados a este item.
Os itens no repositório estão protegidos por copyright, com todos os direitos reservados, salvo quando é indicado o contrário.