Tipo de documento:	Relatório de Pesquisa
Título:	Screening de enzimas de origem bacteriana de importância para biotecnologia
Autor(a):	Laís de Souza Belém
Orientador(a):	Jean Charles da Cunha Peixoto
Resumo:	As Terras Pretas de Índio provavelmente apresentem alguns bilhões de micro-organismos por grama de solo, representados por centenas de diferentes espécies. Entretanto, os estudos sobre a microbiologia desses solos ainda são muito escassos, apesar da importância dos micro-organismos na pedogênese e, certamente, na sustentabilidade dos ecossistemas relacionados. Será preparado o meio sólido Luria-Bertani meio LB, autoclavar a 1 ATM, por 15 minutos. Serão semeadas alíquotas de 0,1 mL para placas de meio LB, realizando o espalhamento com alça de drigalsky. As placas serão incubadas por 3 dias a 30ºC. No 3º dia de incubação, as colônias isoladas com características morfológicas diferentes, serão transferidas e semeadas por esgotamento, em placas contendo meio LB. As placas serão incubadas por 24 horas a 30ºC. As placas que apresentarem crescimento uniforme, sem contaminação, serão submetidas à análise de produção de enzimas. LIPASES (Triacilglicerol) A habilidade para degradar triglicerídeos será testada utilizando-se a trioleína (Sigma Chemical Co. MO. USA) e o corante fluorescente rodamina B (0.001% wt/vol) (Sigma). A atividade Positiva para lipase será medida pela presença de um halo fluorescente laranja em volta da colônia. PROTEASES O ensaio para testar a produção de proteases consiste na habilidade da bactéria em degradar a proteína do leite, caseína. As placas com as colônias serão incubadas à temperatura 35ºC, por até 24 h. A atividade positiva será medida pela presença de um halo claro em volta da colônia bacteriana. AMILASE serão preparadas placas de meio LB contendo gradiente de concentrações de amido de 10mg/ml; 20mg/ml; 30mg/ml; 50mg/ml; 70mg/ml; 90mg/ml e 100mg/ml. A produção de atividade amilolítica será confirmada pela visualização de halos indicando produção de amilase nas placas quando submetidas ao Iodo sublimado (vapores de Iodo). CELULASE O teste para verificar a produção da enzima celulase, pelos isolados bacterianos, consistirá em se adicionar a Carboximetilcelulose a 1% em meio LB 1/4, autoclavar a 0,5 atm durante 15 minutos. Semear as culturas puras das bactérias a serem testadas espalhar os micro-organismos e incubar 24 a 48h. Após crescimento, que deve ser feito em replica plate, inundar umas das placas com solução de vermelho congo 0,25%. As colônias puras serão submetidas a teste de identificação preliminar, utilizando-se o método de Gram conforme método usual. Com este estudo, há a expectativa de que o maior conhecimento do componente bacteriano, da microbiota existente em amostras de solo antrópico - TPI favoreça a prospecção de bactérias que expressem enzimas proteolíticas, lípolíticas, amilases e celulases que possam ser utilizadas futuramente em processos biotecnológicos.
Palavras-chave:	Diversidade bacteriana Enzimas Biotecnologia
Área de conhecimento - CNPQ:	CIÊNCIAS BIOLÓGICAS: MICROBIOLOGIA
Idioma:	pt_BR
País de publicação:	Brasil
Editor:	Universidade Federal do Amazonas
Sigla da Instituição:	UFAM
Faculdade, Instituto ou Departamento:	Parasitologia Instituto de Ciências Biológicas
Nome do programa:	PROGRAMA PIBIC 2015
Tipo de acesso:	Acesso Restrito
URI:	http://riu.ufam.edu.br/handle/prefix/5050
Data do documento:	31-jul-2016
Aparece nas coleções:	Relatórios finais de Iniciação Científica - Ciências Biológicas

Os itens no repositório estão protegidos por copyright, com todos os direitos reservados, salvo quando é indicado o contrário.