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http://riu.ufam.edu.br/handle/prefix/3727| metadata.dc.type: | Relatório de Pesquisa |
| Title: | Transformação genética para a integração de dois cassetes de expressão no genoma da levedura Pichia pastoris. |
| metadata.dc.creator: | João Victor de Melo Verçosa |
| metadata.dc.contributor.advisor1: | Spartaco Astolfi Filho |
| metadata.dc.description.resumo: | A Pichia pastoris foi considerada uma das melhores leveduras para expressão devido a sua característica metilotrófica, pois permitem rígido controle da expressão pela simples manipulação do meio de cultura e indução por metanol. As proteínas a serem expressas serão a glicoamilase e alfa-amilase, simultaneamente, em cassetes de expressão integrados na P. pastoris. Essas enzimas estão no grupo das amilases, que compõem cerca de 30% das enzimas de uso industrial no mundo, sendo amplamente utilizadas para fermentação alcoólica de etanol. Três estratégias de transformação serão testadas, nos quais, primeiramente será integrado o gene da glicoamilase no locus aox1 e a alfa-amilase no locus his4, e o inverso, além da transformação da levedura hospedeira simultaneamente com os cassetes de expressão das duas proteínas direcionando para a integração em loci diferentes. Os clones recombinantes a serem expressos em meio líquido serão selecionados meio sólido. Após a indução, os extratos serão avaliados por meio de gel SDS-PAGE e em ensaios bioquímicos para características sacarificante e dextrinizante. |
| Keywords: | Transformação Integração Amilases |
| metadata.dc.subject.cnpq: | CIÊNCIAS BIOLÓGICAS: BIOQUÍMICA |
| metadata.dc.language: | pt_BR |
| metadata.dc.publisher.country: | Brasil |
| Publisher: | Universidade Federal do Amazonas |
| metadata.dc.publisher.initials: | UFAM |
| metadata.dc.publisher.department: | Biologia Instituto de Ciências Biológicas |
| metadata.dc.publisher.program: | PROGRAMA PIBIC 2013 |
| metadata.dc.rights: | Acesso Restrito |
| URI: | http://riu.ufam.edu.br/handle/prefix/3727 |
| Issue Date: | 31-Jul-2014 |
| Appears in Collections: | Relatórios finais de Iniciação Científica - Ciências Biológicas |
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