Avaliação da resposta linfoproliferativa in vitro com células mononucleares do sangue periférico (PBMC) de pacientes com leishmaniose cutânea antes e após tratamento
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Autores
Orientador(es)
Coorientador(es)
Borges, Paula Figliuolo
Espir, Thais Tibery
Espir, Thais Tibery
Membros da banca
Barcellos, José Fernando Marques
Jensen, Bruno Bezerra
Ohse, Ketlen Christine
Jensen, Bruno Bezerra
Ohse, Ketlen Christine
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Universidade Federal do Amazonas
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Resumo
A leishmaniose Tegumentar é uma doença infecciosa não contagiosa, considerada pela Organização Mundial de Saúde (OMS) como uma doença tropical negligenciada (DTN). A escassez de investimentos em pesquisas científicas e de inovação para esta doença ainda permeiam a sociedade. A Terapêutica preconizada envolve o uso dos antimoniais pentavalentes (Sb5+), embora diversos efeitos adversos graves sejam relacionados. Além disso, A compreensão da patogênese da leishmaniose ainda representa um grande desafio devido à diversidade de vetores e espécies do parasito envolvidas no processo infeccioso. Nesse sentindo, o conhecimento da interação celular frente a esses agentes e o entendimento dos mediadores imunológicos envolvidos na infecção, são fundamentais para desenvolvimento de novos métodos terapêuticos. Desse modo, esse trabalho teve como objetivo avaliar a linfoproliferação e produção de citocinas do sobrenadante de culturas de PBMC estimuladas por bioativos e antígenos solúveis de Leishmania (SLA) por meio de ensaios in vitro. A linfoproliferação foi avaliada frente a estímulos de bioativos obtidos da Libidibia férrea, o Extrato Metanólico (LFME) (600 μg/mL), e a fração diclorometânica (DCM), assim como frente a complexo de cobre (281,4 μg/mL), Glucantime® (100 μg/mL), SLA de L. amazonensis (100 μg/mL), SLA de L. guyanensis (100 μg/mL) e Phytohemagglutinin - PHA (10 μg/mL) utilizando BrdU Cell Proliferation ELISA Kit após 72h de incubação. A quantificação das citocinas IL-6, IL-8 e IL-1b foi realizada por BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Human Th1/Th2/Th17 Cytokine Kit. Os resultados demonstraram que os bioativos avaliados podem potencializar o sistema imune, podendo ser candidatos futuros a tratamentos alternativos ou utilizados como terapia combinada. Quanto aos antígenos solúveis de leishmania, ambos induziram forte linfoproliferação e aumento dos níveis de citocinas inflamatórias, porém significância estatística só houve frente ao antígeno solúvel de Leishmania guyanensis.
Abstract
Cutaneous leishmaniasis is a non-contagious infectious disease, considered by the World Health Organization (WHO) as a neglected tropical disease (NTD). and even investments in scientific research and innovation for this disease affect society. Therapeutics involves the use of pentavalent antimonials (Sb5+), although several adverse effects are related. Furthermore, understanding the pathogenesis of leishmaniasis still represents a great challenge due to the diversity of vectors and species of the parasite involved in the infectious process. In this sense, the knowledge of the interaction with these agents and the understanding of the immunological mediators involved in the action are fundamental for the development of new therapeutic methods. Thus, this work aimed to evaluate the lymphoproliferation and production of cytoprokines from the supernatant of PBMC cultures stimulated by bioactives and soluble Leishmania stimulants (SLA) through in vitro assays. The lymph4 complex front against bioactive stimuli obtained from Libidibition Ferre, the LF, μgmL complex front, and the attribution to copper/something (281 μgmL), Glucantime® (100 μg/mL), L. amazonensis SLA (100 μg/mL), L. guyanensis SLA (100 μg/mL) and Phytohemagglutinin - PHA (10 μg/mL) using the BrdU Cell Proliferation ELISA Kit after 72h incubation. The quantification of IL-6, IL-8 and IL-1b cytokines was performed by BD™ Cytometric Bead Array (CBA) Human Th1/Th2/Th17 Cytokine Kit. The results can be used as a combination therapy. As for the antigens, both soluble Leishmania induced strong lymphoproliferation and increased levels of inflammatory cytokines, but there was only an increase in significance against the soluble Leishmania guyanensis.
Descrição
Termo controlado
Leishmaniose cutânea; Citocinas; Leishmaniose - Tratamento alternativo
Objetivos de Desenvolvimento Sustentável (ODS)
Citação
SILVA, Erika Oliveira da. Avaliação da resposta linfoproliferativa in vitro com células mononucleares do sangue periférico (PBMC) de pacientes com leishmaniose cutânea antes e após tratamento. 2022. 102 f. Tese (Doutorado em Imunologia Básica e Aplicada) - Universidade Federal do Amazonas, Manaus (AM), 2022.
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