Diagnóstico molecular para malária por nestedpcr e pcr em tempo real.

Primeiro orientador
dc.contributor.advisor1
Alecrim, Maria das Graças Costa
Currículo Lattes do primeiro orientador
dc.contributor.advisor1Lattes
http://lattes.cnpq.br/6000588372204544por
Autor
dc.creator
Hipólito, Janayna Roriz
Currículo Lattes do autor
dc.creator.Lattes
http://lattes.cnpq.br/9843647360610472por
Data de disponibilização
dc.date.available
2015-04-07
Data de defesa/publicação
dc.date.issued
2006-07-28
Resumo (português)
dc.description.resumo
A malária é um problema de saúde pública na região Amazônica, mais de 200 mil casos dessa doença ocorrem anualmente no Amazonas, sendo 80% deles causados pelo P. vivax, que vem apresentando índices crescentes de morbidade, principalmente associados à diminuição da sensibilidade aos antimaláricos. Dentre as estratégias para combate e controle da doença, a identificação rápida e precisa da espécie é ferramenta indispensável para um tratamento apropriado, diminuição do risco de transmissão e melhor entendimento da epidemiologia desses parasitas. A técnica microscópica da gota espessa é a principal para diagnóstico da malária, entretanto, outros métodos vêm sendo testados, principalmente os moleculares que tem se mostrado mais sensíveis e específicos para detectar e diferenciar as espécies em baixas parasitemias. Avanços desse método, como a PCR em tempo real, permitem que o resultado do teste seja detectado simultaneamente a amplificação, diminuindo o tempo gasto para a realização do diagnóstico. Com o intuito de detectar molecularmente a malária, verificando a presença de plasmódios, o diagnóstico molecular foi realizado através das técnicas de PCR em tempo real e nested-PCR, para se fazer uma comparação desses dois métodos com o diagnóstico microscópico da gota espessa em 300 amostras criopreservadas, 200 coletadas no dia inicial do tratamento (D0), das quais 88% (176/200) eram provenientes de pacientes de Manaus, as 24 amostras restantes (12%) eram provenientes de localidades do interior do Amazonas: São Gabriel da Cachoeira (09), Tefé (08), Humaitá (04) e Careiro (03). Apenas 9% dessas amostras tinham diagnóstico microscópico de monoinfecção por P. falciparum e 91% (182/200) por P. vivax, não havia nenhuma amostra mista pelo diagnóstico microscópico. O diagnóstico molecular por nested-PCR confirmou a presença de DNA de plasmódio em 100% das amostras monoinfectadas. Adicionalmente, foram observadas infecções mistas, co-infecção de P. falciparum e P. vivax, em 19% (38/200) destas amostras. O diagnóstico molecular por PCR em tempo real (Lightcycler, Roche®) foi realizado em apenas 17% (34/200) dessas amostras. A co-positividade (sensibilidade) dos testes para P. vivax foi em média 71% e a co-negatividade (especificidade) 92%, para P. falciparum a co-positividade foi 91% e a conegatividade 79%. A concordância entre os testes foi regular. As 100 amostras restantes haviam sido coletadas no sétimo dia (D7) de tratamento e eram negativas pela microscopia. O diagnóstico molecular demonstrou 21% de positividade. Este estudo mostrou que muitas infecções mistas vêm sendo subestimadas para fins de avaliação epidemiológica, demonstrando que a sensibilidade e especificidade do diagnóstico molecular são superiores a do teste microscópico. O diagnóstico molecular seria então mais indicado como teste complementar no diagnóstico de pacientes com baixas parasitemias, na análise da quantidade de portadores assintomáticos, em estudo de infecções criptônicas e na avaliação da negativação da parasitemia para monitoramento terapêutico, e em estudos que visem a diminuição da transmissão pela existência de prováveis gametócitos persistentes após o tratamento. Entretanto, esse método não é indicado para rotina de diagnóstico de malária, uma vez que os resultados positivos por essa técnica não significam necessariamente que o paciente desenvolva a doença.por
Agência de fomento / Financiador
dc.description.sponsorship
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas
Formato
dc.format
application/pdfpor
Referência (citação)
dc.identifier.citation
HIPÓLITO, Janayna Roriz. Diagnóstico molecular para malária por nestedpcr e pcr em tempo real.. 2006. 93 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) - Universidade Federal do Amazonas, Manaus, 2006.por
Endereço permanente (URI)
dc.identifier.uri
http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/2242
Idioma
dc.language
porpor
Instituição / Editora
dc.publisher
Universidade Federal do Amazonaspor
País
dc.publisher.country
BRpor
Faculdade, Instituto ou Departamento
dc.publisher.department
Instituto de Ciências Biológicaspor
Sigla da instituição
dc.publisher.initials
UFAMpor
Programa de Pós-Graduação
dc.publisher.program
Programa de Pós-Graduação em Biotecnologiapor
Tipo de acesso
dc.rights
Acesso Abertopor
Área de conhecimento (CNPq)
dc.subject.cnpq
CIÊNCIAS BIOLÓGICASpor
Termo controlado
dc.subject.other
Malária, Diagnóstico, Nested-PCR, PCR em tempo real.por
Termo controlado
dc.subject.other
Malaria, Diagnosis, Nested-PCR, real time PCR.eng
Miniatura (endereço)
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http://200.129.163.131:8080//retrieve/6965/Dissertacao-Janaina%20Roriz%20Hipolito.pdf.jpg*
Título
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Diagnóstico molecular para malária por nestedpcr e pcr em tempo real.por
Tipo de documento
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Dissertaçãopor

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