Potencial larvicida de bactérias isoladas de ambientes amazônicos para o controle de Aedes aegypti (Linnaeus, 1762)
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Orientador(es)
Coorientador(es)
Katak, Ricardo de Melo
Membros da banca
Ferreira, Francisco Augusto da Silva
Rocha, Elerson Matos
Rocha, Elerson Matos
Pós-Graduação
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Editor
Universidade Federal do Amazonas
Tipo
Direito de acesso
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Resumo
O mosquito Aedes aegypti é o principal vetor dos arbovírus da Dengue, Febre Amarela Urbana,
Zika e Chikungunya. Uma das principais ferramentas utilizadas no controle deste vetor são os
inseticidas químicos, porém, o uso contínuo pode provocar fatores negativos no meio ambiente e
na saúde humana, como também pode selecionar mosquitos resistentes. Neste sentido, encontrar
novas alternativas para o seu controle, como o controle biológico utilizando microrganismos
entomopatogênicos pode ser uma alternativa biotecnológica promissora no controle de vetores de
doenças. Portanto, este trabalho tem como objetivo avaliar o potencial químico e biológico de
bactérias amazônicas isoladas de sedimentos para o controle de Ae. aegypti em condições de
laboratório. A coleta das amostras foram obtidas de três lagos do município de Parintins, área
peri-urbana do município. Posteriormente, as amostras foram encaminhadas para o Laboratório
de Malária e Dengue do INPA, onde foi realizado os seguintes procedimentos: isolamento em
dois meios de cultivo (NA e BDA), purificação, coloração de Gram e em seguida a preservação
e armazenamento das bactérias. Para os ensaios biológicos foi utilizado 50 µL do pré-inoculo
adicionado em 5 mL dos respectivos meios. A mortalidade das larvas foi avaliada até 72 horas
após exposição aos cultivos bacterianos. Foram isoladas 50 bactérias utilizando os meios NA (23)
e BDA (27). Das 50 bactérias, 2 linhagens ativas (P2LM3NA e P2LM5NA) para larvas de
Aeaegypti foram identificadas por meio de sequenciamento do gene 16s rRNA. A linhagem
P2LM5NA foi selecionada para obtenção de extratos e avaliar seu potencial larvicida. A
exposição das larvas de Ae. aegypti ao extrato metabólico do sobrenadante da linhagem
P2LM5NA revelou 100% de mortalidade das larvas de L3 no período de 24 horas em duas
concentrações testadas. O extrato obtido do componente celular apresentou 70% de atividade após
72 horas de exposição na concentração de 100 µL. O sequenciamento do gene rRNA 16S e a
análise BLAST permitiu a identificação das linhagens bacterianas deste estudo, onde foi possível
observar que as linhagens bacterianas ativas contra Ae. aegypti apresentam similaridade de
99,88% (P2LM5NA) e 97% (P2LM3NA) com o gênero Bacillus. Foram isoladas espécies
bacterianas que exibem notável atividade larvicida em comparação com a de um produto
comercial Natular® DT. As linhagens bacterianas com potencial larvicida isoladas de três lagos
amazônicos, obtidas neste estudo, poderão ser novos agentes entomopatogênicos para o controle
biológico de populações de A. aegypti.
Abstract
The Aedes aegypti mosquito is the main vector of the arboviruses that cause Dengue,
Urban Yellow Fever, Zika and Chikungunya. One of the main tools used to control this
vector is chemical insecticides, however, their continued use can cause negative effects
on the environment and human health, as well as selecting resistant mosquitoes. In this
sense, finding new alternatives for its control, such as biological control using
entomopathogenic microorganisms, can be a promising biotechnological alternative in
the control of disease vectors. Therefore, this study aims to evaluate the chemical and
biological potential of Amazonian bacteria isolated from sediments for the control of Ae.
aegypti under laboratory conditions. The samples were collected from three lakes in the
municipality of Parintins, a peri-urban area of the municipality. The samples were then
sent to the INPA Malaria and Dengue Laboratory, where the following procedures were
performed: isolation in two culture media (NA and PDA), purification, Gram staining,
and then preservation and storage of the bacteria. For the biological assays, 50 µL of the
pre-inoculum added to 5 mL of the respective media was used. Larval mortality was
assessed up to 72 hours after exposure to bacterial cultures. A total of 50 bacteria were
isolated using NA (23) and PDA (27) media. Of the 50 bacteria, 2 active strains
(P2LM3NA and P2LM5NA) for Aeaegypti larvae were identified by sequencing the 16s
rRNA gene. The P2LM5NA strain was selected to obtain extracts and evaluate its
larvicidal potential. The exposure of Ae. aegypti to the metabolic extract of the
supernatant of the P2LM5NA strain revealed 100% mortality of L3 larvae within 24 hours
at two concentrations tested. The extract obtained from the cellular component showed
70% activity after 72 hours of exposure at a concentration of 100 µL. Sequencing of the
16S rRNA gene and BLAST analysis allowed the identification of the bacterial strains of
this study, where it was possible to observe that the bacterial strains active against Ae.
aegypti present similarity of 99.88% (P2LM5NA) and 97% (P2LM3NA) with the genus
Bacillus. Bacterial species that exhibit remarkable larvicidal activity were isolated
compared to that of a commercial product Natular® DT. The bacterial strains with
larvicidal potential isolated from three Amazonian lakes, obtained in this study, may be
new entomopathogenic agents for the biological control of A. aegypti populations.
Descrição
Palavras-chave
Termo controlado
Aedes aegypti - Controle biológico
Objetivos de Desenvolvimento Sustentável (ODS)
Citação
SOUZA, Jakeline Andrade de. Potencial larvicida de bactérias isoladas de ambientes amazônicos para o controle de Aedes aegypti (Linnaeus, 1762). 2024. 60 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) - Universidade Federal do Amazonas, Manaus (AM), 2024.
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